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ELK Biotechnology總結實驗大鼠、小鼠常用的采血方法
常見小鼠采血方法 小鼠是科研實驗中常用的實驗動物，但由于其體積小，血管細，采血難度大，進而影響采血的質量。 ELK簡要總結了常見的小鼠采血方法，僅供參考： 一只成年小鼠的循環血量大約是1.5~2.5ml，大約體重的 6~8%。在對營養狀況良好的小鼠進行采血時，單次采血量最多可以到達循環血量的10%，（例：若20克小鼠，它的總血量約占1.2-1.4毫升，即每次取120ul-140ul血液不會對小鼠有太大的影響）。采血之后應該給予溫熱的等滲溶液補充，可以在2~3個星期內恢復原有的水平。兩周采血量小于血液循環的10%，單周小于7.5%，小鼠血液循環7
2022-09-20
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ELK組織勻漿樣本的收集處理與保存（史上最全）
? 組織勻漿定義：將分化的細胞群用物理機械手段或其它方法，使細胞破碎，細胞內容物釋放，與細胞碎片形成的固液混合形式的濃稠液體。 一、取適量組織塊，用預冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.4）沖洗，去除表面殘留的血液與雜質。（很多用戶疑惑，這個適量，到底是多少？ELISA試劑盒檢測中：血清或細胞上清樣本用量100μL/指標（單孔）；組織用量15mg/指標（單孔），差不多干枯綠豆大小。?）具體老鼠各器官大小可見下圖。 二、將組織塊稱重，再剪切成盡可能的小碎塊，以便充分勻漿； 三、可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果：
2022-09-20
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ELISA實驗中做好標曲為什么這么重要
酶聯免疫吸附法(ELISA)由于其易于操作，可以簡單地回答樣本中有多少蛋白質/多肽/抗體這一基本問題，是科研中比較常用的一種檢測方法。而這種簡單的分析方法的核心，就是標準曲線。沒有它，我們的實驗就變成了一個二元的“是/不是”測試。有了它，我們可以深入研究生物反應的細節。那么，是什么使得標準曲線如此強大呢?讓我們在ELISA的背景來討論這個問題。 簡單地說，標準品就是一系列已知目標蛋白數量的陽性對照。例如，如果對人類IgG進行ELISA檢測，標準曲線將包含逐漸減少的已知量的人類IgG，它會讓你立刻得出一系列的結論。 1.我的EL
2022-08-01
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NF-κB經典信號通路
NF-kB(核因子激活的B細胞的k-輕槌增強)在細胞因子誘導的基因表達中起關鍵性的調控作用，它調控的基因編碼：急性期反應蛋白、細胞因子、細胞粘附分子、免疫調節分子、病毒癌基因、生長因子、轉錄和生長調控因子等。通過調控多種基因的表達，NF-kB參與免疫反應、炎癥反應、細胞凋亡、腫瘤發生等多種生物進程。 NF-kB家族有由cRel, RelA (p65) , RelB, NF-kB1 (p50)、NF-kB2 (p52)組成,它們在N端都具有Rel同源結構域，其中cReI, ReIA (p65)和ReIB存在轉錄激活區(TAD)，可正向調節基因表達；p52和p50分別由前體蛋白p100、
2022-07-21
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PCR、qPCR、RT-PCR、Real-time PCR區別淺析
PCR技術介紹： 聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction,PCR）是在體外酶促擴增特定DNA片段的技術，由美國Kary Mullis及其同事于1985年發明。熱穩定性Taq DNA聚合酶的應用和自動化裝置的發明與完善，使PCR技術進入實用階段。該技術的發明和廣泛應用，大大推動了分子生物學各相關學科的發展，發明者也因此獲得了1993年的諾貝爾化學獎。 隨著PCR技術的成熟，派生了不少相關技術。這類技術具有敏感、特異、快速和簡單等優勢，在微生物檢驗中的應用越來越廣，不少國家將其納入檢驗的標準方法；
2022-07-13
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PD-1人源化小鼠模型介紹
品系背景∶C57BL/6N 品系構建策略∶ 在小鼠PD-1基因位點敲入人源PD-1胞外域序列，保留小鼠跨膜域和胞內域，構建嵌合型PD-1人源化小鼠模型。 品系說明∶ hPD-1在小鼠體內具有正常的生理表達和調節模式。 PD-1胞外域人源化，利于hPD-1靶向藥物的識別。 保留小鼠PD-1胞內域，保證正常的胞內信號轉導。 小鼠靶基因不表達，避免交叉反應。 小鼠的免疫系統功能健全。 研究應用∶ 本模型可用于評估hPD-1靶向藥物在免疫健全小鼠體內的有效性及安全性∶ 與人源化腫瘤細胞系聯用 例如∶與MC38-hPD-L1腫瘤細胞
2022-05-23
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簡述鐵死亡與慢性病鐵代謝調控機制
鐵是人體必需的微量元素，不僅參與血紅素合成，而且作為一些關鍵酶的輔基在多種生理代謝中發揮重要功能。鐵缺乏可引發缺鐵性貧血。人類遺傳性血色病是一類由基因突變引 起的鐵過載疾病，導致多個器官中鐵積累，皮膚色素沉積及多種器官的病變，如2型糖尿病、 肝纖維化等。超過85% 血色病患者攜帶遺傳性血色素沉著病蛋白（hemochromatosis protein，HFE）突變基因, 少數患者攜帶鐵調素(hepcidin，HAMP)、 鐵調素調節蛋白(hemojuvelin,HJV)、鐵外排蛋白(ferroportin 1,FPN)或轉鐵蛋白受體(transferrinreceptor,TFR)2突變基因，近
2022-05-23
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炎癥因子白介素6
白介素-6 白細胞介素是非常重要的細胞因子家族，截至2022年，得到承認的成員已達40個；它們在免疫細胞的成熟、活化、增殖和免疫調節等一系列過程中均發揮重要作用，此外白細胞介素還參與機體的多種生理及病理反應。 白細胞介素6(interleukin6, IL-6)是細胞因子網絡中的重要成員，在急性炎癥反應中處于中心地位。白介素6于1980年由Weissenbach發現，是一種多功能細胞因子，在人體代謝、自身免疫細胞分化、疾病治療等方面都有重要作用。 IL-6結構特性 ? IL-6是小分子多肽，由四個α螺旋組成。分子量為19-28KD,具有184個氫基酸殘基，
2022-05-23
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